1. 收集細胞培養上清液，0.45μm濾膜過濾，去除細胞和碎片。
【注】：濾膜過濾需使用低蛋白吸附的纖維素醋酸酯或聚醚砜（PES）膜。切忌用硝酸纖維素膜（NC）。
2. 將慢病毒上清液與試劑盒中的濃縮液按照體積比4:1的體積混合（上清液4份，濃縮液1份），混勻后4℃靜置，每隔30min混勻一次，混勻共進行3次。4℃孵育2h或過夜。
【注】：延長孵育時間可以提高回收率。慢病毒顆粒在4℃可以穩定保存數天。
3. 4℃，4000g離心30min。
4. 小心去除上清，不要劇烈晃動管子，一般可見白色沉淀（有時沉淀不可見）。
5. 用初始體積（原上清液體積）1/10 - 1/100的DMEM或PBS重懸病毒顆粒，小心吹打均勻，重懸沉淀物。
6. 重懸后的病毒以50μl/管分裝，-80℃冰箱保存。
【注】：慢病毒凍存液避免反復凍融，否則會降低病毒滴度。

發表文獻：

1.Feng, Ying, Wang, Yao, Wang, Xiangnan, He, Xiaohui, Yang, Chen, Naseri, Ardalan, Pederson, Thoru, Zheng, Jing, Zhang, Shaojie, Xiao, Xiao, Xie, Wei, Ma, Hanhui，Simultaneous epigenetic perturbation and genome imaging reveal distinct roles of H3K9me3 in chromatin architecture and transcription，Genome Biology，2020/12/8

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