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PCR
產品資料

Immortalized Human Mammary Epithelial Progenitor (K5+/K19+) Cells - hTERT

如果您對該產品感興趣的話,可以
產品名稱: Immortalized Human Mammary Epithelial Progenitor (K5+/K19+) Cells - hTERT
產品型號: T0452
產品展商: ABM
產品價格: 0.00 元
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簡單介紹

Immortalized Human Mammary Epithelial Progenitor (K5+/K19+) Cells - hTERT Immortalized Human Mammary Epithelial Progenitor (K5+/K19+) Cells - hTERT 上海 安徽 合肥 ABM細胞庫


Immortalized Human Mammary Epithelial Progenitor (K5+/K19+) Cells - hTERT  的詳細介紹
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生物**水平 II
生物 智人
源器官 乳腺
生長特性 追隨者
形態學 鵝卵石或主軸形
推薦播種密度 將全部內容物解凍成根據傳播說明書中指定的適當的T25燒瓶。
標記

在DCFI-1中生長時,K5,K14,波形蛋白,E-鈣粘蛋白,p63,K8,K18,K19,CD29,CD49f a-SMA,CD10,Thy-1
應用 僅供研究使用
永生化方法 用攜帶hTERT基因的重組慢病毒進行連續傳代和轉導
描述 永生化的人類乳腺祖細胞--HTERT(K5 + / K19 +)是共表達正常乳腺和干細胞標記物的祖細胞的克隆細胞群。它具有自我更新和分化成管腔和/或肌上皮細胞譜系的能力。通過在不同優化培養基中的繁殖,細胞能夠產生具有不同形態和特征的新種群的細胞,如粘蛋白-1陽性細胞,波形蛋白陰性細胞,或表達基底,管腔和其他干細胞標記物。醛脫氫酶1A3酶的表達明顯較高,通常用于分離正常和腫瘤乳腺干細胞。K5 + / K19 +細胞具有Wnt,Notch和hedeghog基因調控途徑。
程序概述
圖片
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傳播 使用PriCoat?T25燒瓶(G299)或應用細胞細胞外基質(G422)是細胞粘附到培養容器所必需的。在以下條件下培養含有ECM的培養容器中的細胞。為了制備DFCI-1,基礎培養基是可從ABM(TM018和TM004)獲得的Prigrow VIII和Prigrow IV(1:1,vol / vol)培養基。為了制備完成的生長培養基,*終濃度為0.01M HEPES(Gibco; 15630),1%胎牛血清(TM999),12.5ng / ml(EGF)表皮生長因子(Z100135) ,6.5ng / ml三碘甲狀腺原氨酸(Sigma; T5516),0.545ng / mlβ-雌二醇(Sigma; E2257),1μg/ ml胰島素(Z101065),1μg/ ml氫化可的松(Sigma; I5500),0.006X乙醇胺; E9508),14.1μg/ ml磷酸乙醇胺(Sigma; P0503),10μg/ ml轉鐵蛋白(Sigma; T2252),2mM谷氨酰胺(Gibco; 250微克/毫升亞硒酸鈉(Sigma; S1382),1ng / mg霍亂毒素(Sigma; C8052),35μg/ ml牛垂體提取物(Hammond Cell Tech),1%青霉素/鏈霉素(G255)或10μg/ ml慶大霉素(Gibco; 15750-060)和10μg/ ml抗壞血酸(Sigma; A4034)。調節至pH 7.4。氣氛:空氣:93.5%,CO 2:6.5%; 溫度:37.0℃。

優化培養基:

用一些肌上皮細胞標記(a-SMA,CD10,Thy-1)表達基底細胞,管腔和干細胞標記物,在DFCI-1中培養細胞。

對于細胞在緊密上皮細胞集落周圍采用紡錘形狀形態,粘蛋白-1陽性細胞的存在在補充有B27(10ml / 500ml培養基)的乳腺上皮生長培養基(MEGM; Lonza CC-3151),20ng / ml(EGF)表皮生長因子(Z100135),20ng / ml FGF2(Z101455),4μg/ ml肝素,和青霉素/鏈霉素(G255)。氣氛:空氣:93.5%,CO 2:6.5%; 溫度:37.0℃。

對于腔分化和肌上皮分化的缺失以及粘蛋白-1陽性和波形蛋白陰性細胞的出現,在DCFI-2培養基中生長細胞,其中堿為α-MEM和Prigrow IV(1:1,體積/體積)介質可從ABM(TM004)獲得。補充,0.01M HEPES(Gibco; 15630),12.5ng / ml(EGF)表皮生長因子(Z100135),6.5ng / ml三碘甲狀腺原氨酸(Sigma; T5516),0.545ng / mlβ-雌二醇(Sigma; E2257) 1μg/ ml胰島素(Z101065),1μg/ ml氫化可的松(Sigma; I5500),0.006X乙醇胺(Sigma; E9508),14.1μg/ ml磷酸乙醇胺(Sigma; P0503),10μg/ ml轉鐵蛋白(Sigma; T2252) ,2mM谷氨酰胺(Gibco; 25030-081),2.6ng / ml亞硒酸鈉(Sigma; S1382),1ng / mg霍亂毒素(Sigma; C8052),0。05%牛血清白蛋白(BSA),1%青霉素/鏈霉素(G255)或10μg/ ml慶大霉素(Gibco; 15750-060)和10μg/ ml抗壞血酸(Sigma; A4034)。調節至pH 7.4。氣氛:空氣:93.5%,CO 2:6.5%; 溫度:37.0℃。
保存 1.冷凍培養基:具有20%FBS和10%DMSO的完全生長培養基。2.儲存溫度:液氮氣相。
質量控制 1)Western印跡以評估細胞譜系相關和干細胞標記物; 2)譜系標記的免疫熒光染色分析; 3)用于基因調控途徑的基因表達譜
放棄 1.該產品的CoA(根據要求提供)僅通過RT-PCR驗證細胞型特異性基因表達。CoA中提供的所有測試參數均使用abm的標準化培養系統和程序進行。所述值可能在*終用戶的文化條件下不同。請通過參考已發表的論文或訂購RNA(0.5μg,Cat。#C207,$ 450.00)或細胞裂解液(100μg,Cat。#C206,$ 600.00)來驗證該產品是否適合您的研究,以進行初步實驗,或者使用我們的基因表達測定服務(Cat#C138)。所有銷售都是*終的。
2.我們強烈推薦活細胞出貨以方便細胞轉移,訂購時可以要求提供此選項。請注意,*終用戶需要考慮到*終目的地的溫度變化及其地理位置來評估活細胞裝運的可行性。此外,我們徹底測試我們的細胞系凍融恢復。如果收集冷凍細胞,并且在實驗室中沒有在**的指定條件下(使用推薦的培養容器,培養基,附加補充劑和大氣條件)回收細胞,則可能需要花費(加運費)進行活細胞更換。
所有abm的細胞生物學產品僅供研究使用,不適用于治療/診斷應用。abm對于在治療/診斷應用中使用其細胞生物學產品引起的任何影響不承擔任何責任。有關詳細信息,請聯系技術服務代表。
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公司簡介
合肥星肽生物科技有限公司作為專業的ABM中國代理商,專業經營原裝進口胎牛血清,細胞因子,ELISA試劑盒,細胞,抗體,生物試劑,耗材,培養基,一抗,二抗等.ABM安徽代理的產品涉及分子生物學,細胞生物學,細菌學,遺傳學,免疫學,生物化學,蛋白質學,細胞治療,臨床應用等領域。合肥星肽生物科技有限公司始終致力于為客戶提供可靠的研究材料以及方便快捷的服務,對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到*終售后的確保項目準確到位,都有相關專業人士進行維護,確保您在合肥合肥星肽生物科技有限公司公司獲得*上等服務
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合肥星肽生物科技有限公司是一家致力于生命科學和生物技術領域的高科技企業,公司地址位于科教名城———合肥市。公司主營多肽合成多肽定制多肽純化多肽制備多肽技術服務。在合肥市與中科院的關懷下,2021年初合肥市高新區與中科院分別與合肥星肽生物科技有限公司簽訂了戰略投資協議。 公司位于合肥市高新區安徽中科資城創業孵化器A區,擁有2000平方米獨立研發中心以及無菌實驗室,四條完善的多肽生產線,配備了Waters LC- MS/MS、Waters UPLC、Waters 全自動純化儀、島津LCMS、全自動凍干系統、紫外分光光度計等專用精密儀器保障合肥星肽生物科技有限公司月產3000條精品多肽的生產能力,這些得以讓我們可以為客戶快速準確的提供各種高質量的多肽產品及服務。 合肥合肥星肽生物科技有限公司始終致力于為您的實驗研究提供高品質、穩定性良好的產品,“做您身邊的多肽合成專家”一直是每個合肥星肽生物科技有限公司人的目標與方向,勵志作為多肽合成行業標準的風向標。公司擁有100余人的專業團隊,其中博士研究生、碩士研究生10余人。在此基礎上公司配備了一套包含從售前到售后的專業團隊,力爭做到每個環節都“清晰明了”,對每一個問題都“吹毛求疵”,讓您的實驗變得更加簡單,正是憑借這樣的信仰和扎實的多肽合成技術優勢,合肥星肽生物科技有限公司已經成為國內外高校與眾多生物醫藥企業誠信的合作伙伴和堅強的技術后盾。 公司秉承“專業鍛造品質,服務打造市場”的經營理念,為國內廣大客戶提供專業的前沿產品、合理的價格、便捷的物流服務。 公司自成立以來,一直致力于多肽合成、多肽定制、多肽純化等多肽制備多肽技術服務的研究。幫助客戶縮短科研周期、節省試驗成本,使客戶的科學研究具有持續性。 實驗室配備一支年輕、專業、富有創造精神且經驗豐富的技術團隊。 合肥星肽生物科技有限公司目前跟國內外企業有著友好的合作往來。斯坦福大學,牛津大學,北京大學,清華大學,天津大學,浙江大學,中科大,香港理工大學,以及中科院遺傳所,過程所,化學所,生物細胞所,微生物所等,北京軍科院**醫學研究所,武漢病毒研究所等有穩定合作。


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